在醫(yī)學(xué)教學(xué)、科研和醫(yī)學(xué)工作中,無(wú)論是在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域,都需要進(jìn)行各種動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。通過(guò)對(duì)動(dòng)物的觀察和分析,來(lái)研究和解決醫(yī)學(xué)上存在的許多問(wèn)題,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)已經(jīng)成為醫(yī)學(xué)科學(xué)研究和教學(xué)工作中不可或缺的重要手段。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法多種多樣,但其中一些基本方法是通用的,包括動(dòng)物的選擇、抓取、固定、麻醉、脫毛、給藥、采血、采尿、急救、處死、尸檢等。不論從事何種醫(yī)學(xué)研究課題,都需要掌握這些基本方法,因此,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基本方法已成為醫(yī)學(xué)科技工作者必備的基本技能。
下面分享一些動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的常用方法:
01、復(fù)制動(dòng)物模型法
此法是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)最基本的方法,是采用人工的方法使動(dòng)物在一定致病因素(機(jī)械、化學(xué)、生物和物理)作用下,造成動(dòng)物的組織,器官或全身的一定損傷,復(fù)制成與人類疾病相似的動(dòng)物疾病模型,來(lái)研究各種疾病的發(fā)生、發(fā)展規(guī)律及防治方法。
02、切開(kāi)、分離法
此法是以活體動(dòng)物為對(duì)象的整體實(shí)驗(yàn)常用方法。習(xí)慣上把在麻醉情況下,制備一些實(shí)驗(yàn)條件(如:活體解剖、分離暴露器官、組織或進(jìn)行一些手術(shù)制備等措施)進(jìn)行的研究稱為“急性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)”。其優(yōu)點(diǎn)是比較簡(jiǎn)便,實(shí)驗(yàn)條件相對(duì)較易控制、對(duì)研究的器官也方便直接觀察。
但存在著麻醉、手術(shù)及存活時(shí)間較短等不良因素,也會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果帶來(lái)一定的影響。因此采用此法應(yīng)注意麻醉深度要適中,手術(shù)要輕巧、少出血、減少創(chuàng)傷,并要熟悉手術(shù)部位的神經(jīng)、血管等。
03、切除和注入提取液法
常用于研究?jī)?nèi)分泌器官的生理和病理病變,如:切除某一腺體后看輻射對(duì)機(jī)體的影響、切除某一腺體后看動(dòng)物出現(xiàn)的癥狀而推論該腺體的功能,比如蝌蚪是無(wú)甲狀腺素的,如果注入甲狀腺素,蝌蚪很快變成了蛙。
04、離體組織器官法
離體實(shí)驗(yàn)是將動(dòng)物的離體組織器官或生物性致病因子(微生物、寄生蟲等),置于一定的存活條件下(如:溫度、營(yíng)養(yǎng)成分、氧氣、水、pH等)進(jìn)行觀察的一種實(shí)驗(yàn)方法。如:利用離體腸管觀察藥物對(duì)腸管蠕動(dòng)、吸收、通透性、血流情況等的影響,并進(jìn)行作用機(jī)理的分析;利用大腸桿菌或其它細(xì)菌進(jìn)行藥物敏感性實(shí)驗(yàn),從而尋找抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的藥物,并研究其作用規(guī)律,以便為腸道感染的防治提供線索。
離體實(shí)驗(yàn)的優(yōu)點(diǎn)是方法比較簡(jiǎn)單,一般不需要很復(fù)雜的儀器設(shè)備、實(shí)驗(yàn)條件也比較容易控制,牽涉的人力較少,所以常被列為分析性研究的一種手段。不足之處是模擬的存活條件畢竟與整體的實(shí)際情況有較大的出入,其結(jié)果也往往與體內(nèi)的變化有一定差距,因此可以作為整體研究的補(bǔ)充和參考。
05、瘺管法
用無(wú)菌手術(shù)方法給動(dòng)物造成不同的人造瘺管如:胃腸道瘺管、膀胱瘺管、唾液腺瘺管、食道瘺管、膽囊瘺管等。這些瘺管可以收集內(nèi)臟液體,是生理學(xué)消化研究的主要方法。此種方法是慢性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)常用的方法。
慢性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)一般先在無(wú)菌操作下制備好實(shí)驗(yàn)?zāi)P停ǒ浌芊ㄊ瞧渲幸环N),待動(dòng)物恢復(fù)健康后進(jìn)行研究。這類研究方法的優(yōu)點(diǎn)在于研究對(duì)象的機(jī)體內(nèi)外環(huán)境已處于較自然且相對(duì)平衡狀態(tài),條件比較穩(wěn)定,所得的結(jié)果接近生理情況。但需要事先制備、術(shù)后護(hù)理、等動(dòng)物恢復(fù)健康后才能從事實(shí)驗(yàn),花費(fèi)時(shí)間較長(zhǎng),工作量較大,因而在選用上受到一定限制。
06、移植法
一般指將動(dòng)物的器官、組織或細(xì)胞進(jìn)行相互移植的一種方法。如骨髓移植時(shí),將小鼠A(供體)的骨髓注入到小鼠B的血液中(受體),很快可見(jiàn)脾結(jié)節(jié)化(脾造血),而脾結(jié)節(jié)的數(shù)量反應(yīng)了造血干細(xì)胞的多少,由此可以觀察干細(xì)胞的變化。
各小鼠之間的骨髓移植叫同種骨髓移植,同一品系小鼠內(nèi)各小鼠之間的骨髓移植叫同系骨髓,小鼠骨髓移植給大鼠則叫異種骨髓移植。此方法也是在實(shí)驗(yàn)研究中常用的。
07、生物電、活性觀察法
生物電觀察法指對(duì)動(dòng)物體各種生物電用電生理記錄儀進(jìn)行觀察記錄,如:心電、肌電、腦電等;活性觀察法指對(duì)動(dòng)物組織中各種活動(dòng)物質(zhì)用生物化學(xué)法測(cè)定,如:各種酶、激素等。
08、病理解剖學(xué)、組織學(xué)觀察法
指采用肉眼觀察、光鏡和電鏡檢查,來(lái)觀察和分析動(dòng)物各種疾病時(shí)病理組織的改變??蓮慕M織學(xué)的角度來(lái)探討疾病防治機(jī)理,例如:通過(guò)闌尾組織切片和肉眼觀察,分析口服中藥、針刺或局部敷藥對(duì)有炎癥闌尾的影響,闡明不同癥狀時(shí)闌尾變化的病理學(xué)特點(diǎn)以及某些病人用中西醫(yī)結(jié)合非手術(shù)治療后復(fù)發(fā)的原因。
近年來(lái),由于電子顯微技術(shù)的進(jìn)展,不僅可以觀察到病變時(shí)細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞器等亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的變化,也可以運(yùn)用電子掃描方法對(duì)動(dòng)物器官的微小結(jié)構(gòu)進(jìn)行完整的表層觀察。
09、免疫學(xué)觀察法
一般指注入抗原使動(dòng)物致敏,制備各種抗血清,如選用新西蘭或大白耳家兔制備病原體免疫血清、間接免疫血清、抗補(bǔ)體抗體血清、抗組織免疫血清等,可以采用免疫熒光技術(shù)、酶標(biāo)記免疫技術(shù)、放射免疫測(cè)定技術(shù)、免疫電鏡技術(shù)等對(duì)動(dòng)物免疫后各種免疫變化進(jìn)行觀察。
當(dāng)然,除此之外,還有其它方法如:聯(lián)體動(dòng)物法,條件反射法、生物遺傳法、放射生物法、藥物化學(xué)等等。