目的 探究斑馬魚(yú)胚胎早期發(fā)育過(guò)程中Micall2a基因的表達(dá)模式,以及該基因?qū)Π唏R魚(yú)血管發(fā)育的影響。
方法 使用Tg (fli:GFP) 轉(zhuǎn)基因斑馬魚(yú) (用綠色熒光蛋白標(biāo)記血管) 和野生型斑馬魚(yú) (AB),采用全胚胎原位雜交 技術(shù)檢測(cè)其早期胚胎不同發(fā)育階段的Micall2a基因表達(dá)水平。通過(guò)顯微注射嗎啉反義寡核苷酸下調(diào)Micall2a基因, 并采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)該基因在斑馬魚(yú)胚胎不同發(fā)育階段mRNA表達(dá)水平。采用激光共聚焦顯微成像 技術(shù),觀察并分析 Micall2a基因下調(diào)后斑馬魚(yú)的血管表型變化。
結(jié)果 受精后 24 h (24 hours post-fertilization, 24 hpf)、36 hpf和48 hpf的斑馬魚(yú)早期胚胎的腦、心臟、血管系統(tǒng)中均有Micall2a基因表達(dá)。顯微注射嗎啉反義寡 核苷酸后 Micall2a 基因的 mRNA 水平增加,抑制斑馬魚(yú)胚胎的血管發(fā)育,導(dǎo)致斑馬魚(yú)節(jié)間血管發(fā)育缺陷。
結(jié)論 Micall2a基因表達(dá)下調(diào)可以抑制斑馬魚(yú)血管的發(fā)育。
閱讀原文:Micall2a基因表達(dá)下調(diào)抑制斑馬魚(yú)血管發(fā)育.pdf