一、實(shí)驗(yàn)材料
牛二型膠原（北京博蕾德技術(shù)發(fā)展有限公司，20022）
CFA （北京博蕾德技術(shù)發(fā)展有限公司，7008）
二、實(shí)驗(yàn)方法
1、將牛二型膠原溶于0.05M醋酸中，終濃度2-4mg/ml,溫和攪拌，4℃過夜。
2、將牛二型膠原醋酸溶液與CFA等量混合并乳化，乳化使用高速攪拌器，冰浴攪拌CFA和膠原溶液，一般攪拌3次，30000rpm/3min。保證乳化液滴入水中成團(tuán)不散開。
3、初次免疫：小鼠尾根注射0.1ml乳液。從尾根部2cm處插入針頭，針尖距離尾根0.5cm注射。
4、二次免疫：第21天，小鼠尾根再次注射0.1ml乳液。從尾根部2cm處插入針頭，針尖距離尾根0.5cm注射。
5、一般在二次免疫后7-12天，模型組小鼠80%以上會(huì)出現(xiàn)關(guān)節(jié)炎癥狀。根據(jù)小鼠關(guān)節(jié)紅腫程度和活動(dòng)狀態(tài)進(jìn)行臨床評(píng)分。在實(shí)驗(yàn)前和實(shí)驗(yàn)后的第3、5、7、12天分別觀察記錄。
評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：
得分 | 發(fā)病情況 |
0 | 正常 |
1 | 腳部皮膚發(fā)紅，無明顯腫脹 |
2 | 輕度的踝關(guān)節(jié)、腕關(guān)節(jié)發(fā)紅、腫脹 |
3 | 踝關(guān)節(jié)或腕關(guān)節(jié)中度發(fā)紅腫脹 |
4 | 腳趾及關(guān)節(jié)紅腫嚴(yán)重，強(qiáng)直或畸形 |
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